文章主要内容
与洁净室相关的真菌类型
这些真菌在外界环境中普遍存在且通过气流扩散。
小编:跟我们在2017-2018年年度报告中的分析到的常见真菌检出类型基本一致(传送门)
制药生产环境中的潜在真菌污染来源(鱼骨图)
对任何污染事件的评估都应该通过调查和根本原因分析来解决,有不同的技巧可以用于此类调查。为了更好的完成调查,正确的定义和描述事件或问题很重要(问“五个为什么”这个技巧在这里很有用)。随后,应确定从正常情况到关注点的时间线。风险工具如故障模式和影响分析(FEMA)和危害分析与关键点控制(HACCP)等通常是有效的,使用“是/不是”表和矛盾矩阵等方法收集信息并找出疑问,这些方法有助于区分根本原因和影响因素。这些方法是有助于呈现问题的预测方法。
接下来要更详细的探讨一些需要考虑的更常见区域和需要采取的行动。
小编:常见洁净室真菌:
常见环境真菌——青霉属和曲霉属
建筑和潮湿环境——芽枝霉属
人源——曲霉属、青霉属、Trychophyton(毛癣菌属)
当然,鉴于许多真菌的普遍存在性,这些结论并不是确凿无疑的。对洁净室微生物菌群的定期回顾可以为任何分离到的真菌在常规的环境微生物菌落中的占比高低提供线索。这类回顾对于消毒剂的效果验证实验也非常重要。
大体上有两种纠正措施:第一是发现问题的根源并加以纠正;第二是修复问题区域,包括进行维修和运行有效的清洁和消毒制度。后者涉及到最佳消毒剂类型的选择-其中一种是杀孢子剂,并已证明其对清除(设备/环境)表面真菌孢子的效果。
在对问题响应的方面,一个常见的问题的潮湿区域或者因漏水而受损的区域。洁净室人员应迅速对设施内的漏水情况作出反应,尽快修复或者更换损坏的墙壁和天花板。
真菌孢子对许多化学物质都有抗性。真菌细胞可能对一种或多种常用的杀菌剂具有通透性屏障的固有能力。理论上,真菌孢子比细菌内生孢子更容易杀死,然而实际上并非总是如此。有些真菌能分泌酶,干扰特定的消毒剂并使其失活。此外,如果一个区域有真菌存在,那么真菌孢子通常比细菌多得多,因而对清洁和消杀的挑战更大。为了克服这个问题,必须要进行多轮清洁和消毒。
清洁和消毒的关键:
a) 使用有效的清洁剂。在有泥土、灰尘、碎片等地方,消毒剂的渗透性较差(比如像洁净室中石膏面板掉落的情况),在使用消毒剂之前,需要先进行有效的清洁。
b) 使用一种以上的消毒剂是明智的。
c) 选用的消毒剂必须具抗一系列真菌的能力。消灭孢子(细菌和真菌)通常更需要不同的接触时间,而不是标准消毒周期。
d) 为了杀死孢子,包括细菌和真菌,需要使用杀孢子剂。除了杀死孢子外,杀孢子剂还可以杀死所有的营养细胞。
e) 消毒剂需要在规定的接触时间内,在有效的温度范围内使用。反复擦拭,可以提高消毒剂的效果。
合适的消毒剂类型包括含氯类或者过氧乙酸类,或过氧化氢,或过氧乙酸和过氧化氢的混合物。在消毒剂能够达到有机体并有足够接触时间的情况下,目前没有已知的因素表明,洁净环境表面的普通真菌能够抵抗消毒剂。
影响消毒剂对真菌(以及对细菌内孢子)的有效性的一些因素有:
a) 该药剂的固有生物杀灭活性;
b) 消毒剂的浓度;
c) 接触时间。接触时间可能会因为洁净室的不同而有所不同。一些高气流的洁净室的换气效率比其他洁净室快,这可能导致杀孢子剂干燥得更快。由于干燥速度更快,可能需要重新涂抹。
d) 待消毒表面的性质。在不同的表面,消毒剂效果存在差异。此外,随着表面老化(形成隆起等),微生物可以黏附的更深,消毒剂可能无法有效渗透。
e) 表面的清洁度。杀孢子剂在有污垢的地方渗透能力特别差。
f) 应用方法。杀孢子剂应用于表面的方法需要明确定义。在几乎所有情况下,喷洒和擦拭比仅仅简单的喷洒更有效。
g) 表面的物化性质。(可能影响微生物表面粘附)
h) 用来稀释消毒剂的水的硬度。
i) 微生物种类和数量(微生物越多,种群越难杀死)。
j) 温度。大多数杀孢子剂在低温下效果很差,比如在寒冷的房间里。
k) 稳定性。一个影响因素,关系到消毒剂被制备好后是否稳定。
通过对生产环境的微生物群落的评估来进行消毒剂效果的评价是一个好方法。
作为纠正措施的延伸,对真菌污染更进一步的预防措施是对洁净室进行良好的设计。例如,这里的设备应具有足够的空调控制系统,例如ISO 14644 9级(欧盟GMP D级,实施中)区域的换气率至少是每小时15次,以及ISO 14644 8级(欧盟GMP C级,实施中)区域换气率每小时20次。同时,还需要考虑空气分配,以确保洁净室的所有区域都能获得新鲜和适当调节的空气,因为室内机械通风对建筑物内的微生物群落有重大影响。
此外,在生产环境中使用的织物应采用不吸水或不促进真菌生长的无孔材料。为了增加进一步的保护,可以使用一些抗真菌涂料和油漆。空调控制系统的另一方面是提供合适的温度和湿度控制,避免可能促进真菌生长的极端情况。其他设计因素包括确保设计的表面便于接近,并且表面易于清洁和消毒。
药品微生物检测人员面临的问题
尽管洁净生产环境中的真菌存在与药品召回之间的联系是明确的,但是制药企业面临的任务并不简单。这在一定程度上是由于缺乏真菌检测和鉴定等方面的经验: 据Cundell称,制药企业面临的共同问题包括: 1、在环境监测过程中对真菌的分离和趋势的关注可能不够; 2、消杀剂有效性验证可能并不能充分说明针对真菌孢子的消杀活性; 3、在产品或环境监测中发现的真菌很难被计数。许多采集到的真菌是丝状的,有带孢子孢子的气生菌丝。这种生长方式会使得以菌落方式评估真菌水平的适用性受到质疑。 4、在渗水可能促进真菌在制药设施中生长缺乏足够的认识; 5、大多数的药物微生物实验室缺乏可靠的,鉴别真菌属,特别是真菌种的能力。 需要充分注意上面的每一个问题才有助于解决洁净室中的真菌带来的问题。
总 结
原文:Investigating and Addressing Fungal Contamination in Pharmaceutical Cleanrooms By Tim Sandle Mar 23, 2018 6:05 am PDT